防護(hù)口罩檢驗(yàn)方法

B1產(chǎn)品采集與樣品處理

于同一批號(hào)的二個(gè)運(yùn)輸包裝中至少抽取12個(gè)蕞小銷(xiāo)售包裝樣品，1/4樣品用于檢測(cè)，1/4樣品用于留樣，另1/2樣品（可就地封存）必要時(shí)用于復(fù)檢。抽樣的蕞小銷(xiāo)售包裝不應(yīng)有破裂，檢驗(yàn)前不得啟開(kāi)。

在級(jí)凈化條件下用無(wú)菌方法打開(kāi)用于檢測(cè)的至少3個(gè)包裝，從每個(gè)包裝中取樣，準(zhǔn)確稱(chēng)取±1g樣品。剪碎后加人到滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品用原液直接做樣液。

如被檢樣品含有大量吸水樹(shù)脂材料而導(dǎo)致不能吸出足夠樣液時(shí)，稀釋液量可按每次遞增，直至能吸出足夠測(cè)試用樣液。在計(jì)算細(xì)菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時(shí)相應(yīng)調(diào)整稀釋度。

B2細(xì)菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測(cè)方法

本方法適用于產(chǎn)品初始污染菌與細(xì)菌菌落總數(shù)（以下統(tǒng)稱(chēng)為細(xì)菌菌落總數(shù)）檢測(cè)。

B2.1操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。共接種5個(gè)平皿，每個(gè)平皿中加人1ml樣液，然后用冷卻至45℃左右的熔化的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15～倒人每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置35℃±2℃培養(yǎng)后，計(jì)算平板上的菌落數(shù)。

B2.2結(jié)果報(bào)告

菌落呈片狀生長(zhǎng)的平板不宜采用；計(jì)數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式（B1）計(jì)算結(jié)果：

X1=A×（K÷5）

式中X1—–細(xì)菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL；

A——5塊營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上的細(xì)菌菌落總數(shù)；

K——稀釋度。

當(dāng)菌落數(shù)在以?xún)?nèi)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于時(shí)采用二位有效數(shù)字。

如果樣品菌落總數(shù)超過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，按B2.3進(jìn)行復(fù)檢和結(jié)果報(bào)告。

B2.3檢方法

將留存的復(fù)檢樣品依前法復(fù)測(cè)2次，2次結(jié)果平均值都達(dá)到本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，則判定被檢樣品合格；其中有任何1次結(jié)果平均值超過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。

B3大腸菌群檢測(cè)方法

B3.1操作步驟

取樣液5ml接種，乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35℃±2℃培養(yǎng)，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報(bào)告為大腸菌群陰性。

如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線(xiàn)接種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18～，觀察平板上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。

取疑似菌落1-2個(gè)作革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)醉管，置35℃±2℃培養(yǎng)，觀察產(chǎn)氣情況。

B3.2結(jié)果報(bào)告

凡乳糖膽鹽發(fā)酵骨產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平板上有典型大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無(wú)芽胞桿菌，可報(bào)告被檢樣品檢出大腸桿菌。

B4綠膿桿菌檢測(cè)方法

B4.1操作步驟

取樣液5ml，加人到SCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)18～。如有綠膿桿菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液農(nóng)面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍(lán)綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線(xiàn)接種十六烷三甲基溴化胺瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18～，觀察菌落特征。綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周?chē)囵B(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長(zhǎng)。

取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：

氧化酶試驗(yàn)：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對(duì)苯二胺試液，內(nèi)出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，不變色者為陰性。

綠膿菌素試驗(yàn)：取2-3個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基斜面，35℃±2℃培養(yǎng)，加入3～5ml，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三-氯-甲-烷呈藍(lán)色時(shí)，用吸管移到另一試管中并加人1mol/L的鹽酸1mL，振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽(yáng)性，表示有綠膿菌素存在。